バイオ医薬品開発のためのキャピラリー電気泳動法
1つのプラットフォームで複数の特性解析アッセイを実施し、未来を切り拓く
PA 800 Plus システムのキャピラリー電気泳動法 (CE) により、タンパク質や次世代医薬品の開発において、常に超高品質の分離が可能になります。
タンパク質の純度、核酸の純度と完全性、タンパク質の電荷不均一性、カプシドタンパク質の純度、および糖鎖の分布についての理解を深めます。メソッド開発を最小限に抑え、イノベーションを最大化するように設計された単一のプラットフォームを使用して、常に変化するパイプラインの課題を克服します。
バイオ医薬品の評価には、キャピラリー電気泳動 の信頼できる専門知識が必要です。
利点
柔軟性
キットベースのアッセイとカスタマイズ可能な機能により、バイオ医薬品の品質特性に関する貴重な洞察を獲得し、進化する医薬品開発パイプラインに対応します。
品質
業界および規制で信頼されているテクノロジーを使用して必要な分離能と再現性を実現し、プラットフォームの互換性によりデータ管理のニーズを満たします。
データ移植性
QC または規制環境に適用可能なメソッドを開発し、編集を制限します。 実証済みの移植性を備えた頑健なキットベースのワークフローを使用して、機器間またはサイト間でメソッドを簡単に転送できます。
主な特徴
溶媒の温度制御
一貫した結果を達成する
わずかな温度変化でも結果が乱れる可能性があります。専用のクーラントにより、キャピラリー内の分離温度を正確に制御できます。
複数の注入モード
柔軟性こそがすべてです。
正確な制御により、一貫性と再現性のある結果を保証します。電気的注入法により最高級の分離度を実現し、加圧による流体力学的注入で高イオン強度のサンプルへ対処し、電場増幅試料スタッキングで感度を向上します。
分離電圧
スピード以上に品質が重要なとき。
分離度と分析時間の完璧なバランスを実現します。最大 30 kV の分離電圧を印加して、ワークフローとサンプルのニーズに合わせてカスタマイズします。
検出波長
ノイズや無関係なターゲットを排除します。
広範囲の検出波長を調整することで、特定の分析対象物のシグナル対ノイズ比を高め、正確で信頼性の高い結果を保証します。
キャピラリー長
サイズを切り替えると分離が強化されます。
キャピラリーコーティングを選択することでキャピラリー特定の分析対象物の選択性を高め、優れた分離度を実現します。
検出器の種類
すべてを簡単に検出できるわけではありません。
ニーズに応じて UV 検出器と LIF 検出器を切り替えることで、高感度を実現し、低濃度を検出できます。
製薬企業の主要なアッセイをサポートするキットベースのワークフロー
モノクローナル抗体および複雑なタンパク質の適応
- タンパク質の純度と不均一性
- 電荷不均一性モニタリング
- チャージバリアントの特性解析
- N結合型糖鎖分析
細胞および遺伝子治療への適応
- ウイルスベクターカプシドタンパク質純度
- 大小のRNA純度と完全性
- アイソフォームおよび線状二本鎖DNA（dsDNA）分析
- 完全粒子/空粒子アデノ随伴ウイルス（AAV）の分析
- 一本鎖オリゴヌクレオチド分析
mAbとmAbバリアント
CE-SDSによる純度および不均一性分析
ドデシル硫酸ナトリウム-キャピラリー電気泳動法（CE-SDS）を用いて、タンパク質の相対的な分子量を測定し、バイオ医薬品のサイズ不均一性、純度、製造の一貫性を評価します。
非還元型 mAbs と還元型 mAbs の両方について、自動化された定量的な純度データを迅速かつ正確に取得します。
- キャピラリー電気泳動-SDS高速分離（最速12～18分）
- 存在比0.01%の不純物を定量
還元型 (上) と非還元型 (下) IgG の適合性テスト解析。
ピーク識別: 1: 内部標準 (10 kDa); 2: 軽鎖 (L); 3: 非グリコシル化 (NG) 重鎖 (H); 4: 重鎖 (H); 6: 重鎖 (2H); 7: 2 重鎖 1 軽鎖 (2H1L); 8: NG HC; 9: IgG モノマー。
キャピラリーゾーン電気泳動法によるネイティブチャージバリアント解析
キャピラリーゾーン電気泳動法 (CZE) は、ネイティブ状態での分析の利点と、キャピラリー電気泳動法に期待される速度および分離度を組み合わせたものです。CZEは、抗体薬物複合体 (ADC)、前臨床モノクローナル抗体 (mAbs)、融合タンパク質などの治療用タンパク質に、メソッド開発をほとんどまたはまったく必要とせずに簡単に適用できます。
希釈して、注入し、次の キャピラリー電気泳動 アプリケーションの準備をするだけです。
- 10分でチャージバリアントをスクリーニング
- 迅速で簡単なサンプル前処理で時間を節約
- 同じメソッドを幅広いpI範囲に適用する
トラスツズマブのエレクトロフェログラム全体と拡大図。
超高分離キャピラリー等電点電気泳動法によるタンパク質電荷不均一性
キャピラリー等電点電気泳動 (cIEF) を使用してタンパク質の電荷不均一性を正確に判定し、分子の同一性と安定性を確立します。
- 1回の測定で精確な等電点を実現
- 強酸性および塩基性バリアントにおいても高いpI精度
- 広範なpIにわたって高い分離
同一の分離条件で異なるロットの キャピラリー等電点電気泳動。
迅速な糖鎖同定
Fast glycan labeling and analysis kitは、糖鎖の不均一性を迅速に識別します。簡素化されたサンプル前処理、迅速な分離、自動化された糖鎖識別を組み合わせることで、自信を持って迅速に判断を下すことができます。
- 磁気ビーズを使用した1時間のサンプル調製
- HILICより最大2倍高速
- 自動糖鎖同定
- 一度に1～96個のサンプルを分析
HR-NCHO ゲル バッファを使用した PNGase F 処理および蛍光標識 IgG N-型糖鎖の超高分離能 キャピラリー電気泳動 分析。
In vitro 転写合成RNA
キャピラリーゲル電気泳動法によるmRNAおよびその他のIVT RNAの純度と完全性
RNA の完全性と品質の分析は、RNA ベースの治療製剤やワクチンの有効性を保証するために重要です。 50 ～ 9,000 ヌクレオチド以上の一本鎖オリゴヌクレオチドを分離するために設計されています。
- 開発初期から品質試験までの分析に対応
- LNPから分離したmRNAフラグメントとCRISPR Cas9治療システムの高分離
LNP から抽出した mRNA のエレクトロフェログラム。
3'ポリ(A)テールのサイズ評価
製品の安定性を理解することは、医薬品の改善の基礎となります。ssDNA 100-R kitを使用すると、成熟した mRNA 製品のアデノシンテールの長さの分布プロファイルを判定する結果を提供します。
- 優れた塩基分離能で3'末端のサイズ情報を取得
- 10～100塩基の直線性を持つ一本鎖DNAを解析
キャピラリーゲル電気泳動法-UV による mRNA からのポリ[A]テール解析。エレクトロフェログラムは、最も豊富なピークを含む長さが 121 nt である mRNA ポリ [A] テールの 1 塩基差の分離を示しています。
キャピラリーゲル電気泳動法による重要な原料物質の純度とサイズ
pDNA の品質は、タンパク質、ウイルスベクター、in vitro 転写合成 RNA (IVT RNA) の高効率製造に非常に重要です。pDNA のさまざまなトポロジカルを優れた分離で線形化効率を決定します。
- 100bpから20,000bpまでの幅広いサイズ範囲
- 定量的
- 開発段階から品質管理段階までアッセイを確実に移行
7.9kb プラスミド サンプルの線形化プラスミド純度分析とサイズ推定。エレクトロフェログラムは、主にスーパーコイル状アイソフォームを含む線形化前のサンプルと線形化後のサンプルを示しています。
ウイルスベクター
キャピラリー電気泳動-SDSによるカプシドタンパク質の純度と比率
ワクチンや治療薬の開発のためのウイルスベクターの特性解析には、ウイルスタンパク質の評価が含まれます。純度とタンパク質比率に関する情報は液体クロマトグラフィーで取得できますが、VP' フォームの欠落を回避するには キャピラリー電気泳動 を使用した直交アプローチが有利です。さまざまな血清型やウイルスベクターに適したキットベースのタンパク質プロファイリング ワークフローにより、長時間のアッセイ開発を回避できます。
- タンパク質ベースの力価を自信を持って測定
- 高い分離能でタンパク質プロファイルと不純物を理解
- より迅速なメソッド開発と、より大きなサンプルバッチを実行する能力により、時間を節約できます。
異なる AAV 血清型からの VP タンパク質の分離。CE-SDS-LIFにより、蛍光標識でラベルされたVPタンパク質の優れた解像度が達成されました。
キャピラリーゲル電気泳動法によるウイルスゲノムの完全性
ウイルスゲノムの完全性と純度は、ベクターの効力、免疫原性、および導入効率に影響を与える CQA です。 さまざまな血清型やウイルスベクターに適したワークフローを使用して、ウイルスベクターのゲノム解析を簡素化します。
- ゲノムの完全性、ゲノム力価、不純物を確実に判定
- キットベースの画期的ソリューションで、スムーズかつ再現性の高い高品質な分析を実行
- データ管理システムとの互換性によりデータ管理を効率化
キャピラリーゲル電気泳動法 および 蛍光検出による AAV8 の高分離度ゲノム整合性解析。2.4kb の完全なゲノムは、潜在的な部分ゲノムや宿主細胞の RNA および DNA 不純物から見事に分離されていました。
キャピラリーゲル電気泳動法とCE-SDSによる完全粒子/空粒子カプシド比
1 つのプラットフォームで、完全粒子/空粒子の比率を含む複数の CQA を決定します。
- セロトタイプに依存しないワークフローで、ゲノムの完全性、カプシドタンパク質、部分カプシドを含む完全粒子/空粒子比を評価
- 一般的なデータ管理システムとの互換性によりコンプライアンスのニーズに対応
完全粒子/空粒子カプシドの決定のための検量線。 左: キャピラリーゲル電気泳動法 による AAV ゲノム力価の測定。リニアダイナミックレンジ (LDR) は 2.56x1010 GC/mL ～ 2.62x1013 GC/mL の範囲で決定され、R2 = 0.9967 でした。右: LDR による AAV カプシド力価の測定 (6.41 x 109 GC/mL ～ 2.62 x 1013 GC/mL、R2 = 0.9973)。
キャピラリーゲル電気泳動法で重要な原料物質を評価する
広範囲にわたって pDNA フラグメントのサイズを決定します。
- プラスミドのトポロジカルバリアントを区別し、純度を簡単に決定します
- 蛍光検出により開発初期段階のサンプルの高感度化を実現
- 優れた精度で開発初期から品質管理までアッセイを確実に移行
- データ管理システムとの互換性によりデータ管理を効率化
DNA 20 kb プラスミドおよびリニア キットを使用して 5 つのプラスミド (2.7～18.9 kb) のトポロジカル アイソフォームを分離しました。
キャピラリーゲル電気泳動法を含む宿主細胞由来DNA
100～15,000 bp の線形 dsDNA ラダーのベースライン分離を示すエレクトロフェログラム。
遺伝子編集
sgRNAとmRNAの純度と完全性
- CRISPR遺伝子編集アプリケーション用のシングルガイドRNA（sgRNA）とmRNAの純度と完全性を同時に決定します
- 関連する核酸不純物を理解し、広いサイズ範囲（50～9,000 nt）にわたってサイズと量を決定する
- 一般的なデータ管理システムとの互換性によりコンプライアンスのニーズに対応
BioPhase 8800 システムを使用した、sgRNA と Cas9 mRNA の混合物と RNA ラダーのエレクトロフェログラムのオーバーレイ。約 4500 nt の mRNA と 100 nt の sgRNA を同一分析内で評価できます (緑のトレース)。RNA ラダーは青で表示されます。
プライム編集ガイドRNA（pegRNA）の純度
中間製品の純度評価において優れた分離度と再現性を実現します。
- 液体ベースの温度制御で二次構造の限界を突破
- 一般的なデータ管理システムとの互換性により、データ管理を合理化し、コンプライアンスのニーズに対応します。
同様の長さを持つ pegRNA (青いトレース) と非相補的 RNA 標準 (STD、緑のトレース) の キャピラリーゲル電気泳動法。左: メソッドの最適化前、pegRNA (青いトレース) は非相補的な STD (緑のトレース) と比較して大幅なテーリングを示しています。右: メソッドの最適化後、pegRNA サンプルは非相補的 STD と同等のピーク幅を持つ単一の鋭いピークを示します。
キャピラリーゲル電気泳動法による原料物質の純度
キャピラリーゲル電気泳動法による原料物質の純度
- pDNAのトポロジカルバリアントを優れた分離でリニアライズ効率を決定
- 幅広いサイズ範囲にわたる超高分解能分離により、リニアDNAのサイズと純度を自信を持って評価します
- データ管理システムとの互換性により、データ管理を合理化
- 開発から品質管理までアッセイを確実に移行
7.9kb プラスミド サンプルの線形化プラスミド純度分析とサイズ推定。エレクトロフェログラムは、主にスーパーコイル状アイソフォームを含む線形化前のサンプルと線形化後のサンプルを示しています。
業界および規制で実証されたキャピラリー電気泳動テクノロジー
“A sensitive, analytical method for quantitative estimation of product-related impurities such as nonglycosylated molecules, half antibodies, and fragments.” - USP 39 NF 34 Chapter を参照
QC または規制環境に適用可能なメソッドを開発し、編集を制限します。PA 800 Plusシステムは、実証済みの移植性を備えた頑健な自動化アッセイを使用してメソッドを簡単に共有できるため、グローバルなマルチユーザー、複数台所有の組織に最適です。
SCIEXのCEシステムは、常にお客様の品質期待に応えるか、またはそれを上回ることで世界的な評価を得ています。当社の卓越性と継続的な改善への取り組みは、ISO 9001:2008 の要件に準拠した包括的な品質管理システムに反映されています。
ソフトウェア
直接制御によりデータ管理のニーズを満たします。規制法規の遵守を可能にするシステムにより、バイオ医薬品の成功を自信を持って守ります。
Empower ソフトウェア用の PA 800 Plus ドライバー
規制リスクを軽減し、メソッド移行の効率を最大化します。Empower ソフトウェア用の PA 800 Plus ドライバーを使用して、PA 800 Plus システムと Empower Chromatography Data Systemの高度な統合を可能にします。
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